Tipos de Medios de Cultivo Microbiológicos

1. Medios simples o definidos: Componentes de alta pureza que permiten conocer su composición química (cualitativa y cuantitativa).
2. Medios complejos: Contienen compuestos indefinidos, naturales o complejos (ej., agar nutritivo, peptonas, extracto de carne o levadura).
3. Medios de enriquecimiento: Favorecen el crecimiento de microorganismos específicos sin inhibir completamente el desarrollo de otros.
   • Caldo Fraser: Utilizado para el enriquecimiento de Listeria monocytogenes en alimentos.
   • Caldo Tetrationato: Empleado para el enriquecimiento de Salmonella en muestras de alimentos y aguas.
   • Caldo Tioglicolato: Medio anaerobio utilizado para el crecimiento de bacterias anaerobias y microaerófilas.
4. Medios diferenciales: Contienen sustancias que permiten visualizar propiedades de crecimiento microbiano, ayudando a diferenciar entre distintos microorganismos.
   • Agar-Sangre: Diferencia bacterias con capacidad hemolítica de aquellas no hemolíticas o gamma-hemolíticas.
   • Agar Eosina Azul de Metileno (EMB): Diferencia coliformes (fermentan lactosa, producen brillo metálico) de bacterias no fermentadoras de lactosa (incoloras o rosa pálido).
5. Medios cromogénicos: Alteran el color de las colonias del microorganismo, siendo este color característico para su identificación.
   • CHROMagar^TM Candida: Permite la diferenciación de especies de Candida (C. albicans, C. tropicalis, C. krusei) mediante colores específicos.
   • Brilliance^TM UTI Agar: Identifica patógenos comunes en infecciones del tracto urinario (E. coli, Enterococcus, Proteus, Klebsiella, Pseudomonas), cada uno con un color distintivo.
   • CCA Agar Cromogénico: Identifica E. coli (colonias azules) y coliformes (colonias rosadas) en muestras de agua y alimentos.
6. Medios selectivos: Solo permiten el crecimiento de ciertos microorganismos, inhibiendo el desarrollo de los demás.
   • Medio Löwenstein-Jensen: Contiene verde de malaquita, selectivo para micobacterias, como Mycobacterium tuberculosis.
     • El verde de malaquita inhibe el desarrollo de bacterias Gram-positivas y algunas Gram-negativas.
     • La glicerina estimula el crecimiento de Mycobacterium tuberculosis.
   • Medio Thayer-Martin: Selectivo para cepas patógenas de Neisseria.
     • Contiene vancomicina, colistina, nistatina y trimetoprima.
     • Inhibe el desarrollo de bacterias Gram-positivas y Gram-negativas (excepto Neisseria) y levaduras.
7. Medios selectivos y diferenciales:
   • Agar MacConkey: Medio selectivo para bacterias Gram-negativas y diferencial en función de la fermentación de lactosa (positivas: rosa; negativas: no cambian de color).
     • Incluye sales biliares y cristal violeta, que inhiben el crecimiento de bacterias Gram-positivas.
     • Las bacterias que fermentan lactosa producen ácidos, precipitan las sales biliares y provocan un color rojo/rosa.

Técnicas de Inoculación y Siembra en Medios de Cultivo

• Técnica aséptica: Procedimientos y técnicas utilizados para reducir al mínimo la contaminación microbiana (ej., uso de mechero Bunsen).
• Siembra por extensión: Realizada en placa con asa de Digralsky.
• Siembra en estría: Utiliza asa de platino o asa de plástico estéril en placa o tubo con agar inclinado (siembra por agotamiento en estría).
• Siembra de tubos y galerías de microtubos: Implica la inoculación de la muestra en medio líquido o agar semisólido mediante punción limpia.
• Siembra de matraces con medio líquido.
• Siembra dentro del agar.

Amplificación y Secuenciación de Ácidos Nucleicos (ADN/ARN)

A partir de ADN

1. Extracción de ADN del microorganismo: Se utilizan kits específicos para la extracción de ADN de diversas fuentes (bacterias, hongos, sangre, suelo, etc.).

A partir de ARN

1. Extracción de ARN del microorganismo: Se emplean kits de extracción y material específico para ARN, con eliminación de ARNasas.
2. Copia del ARN a ADNc (o cDNA):
   • Enzima: Retrotranscriptasa inversa.
   • Se utilizan kits de retrotranscripción.

En común

1. PCR para amplificar el fragmento de ADN correspondiente:
   • Cebadores (Primers): Específicos del fragmento a amplificar (ej., 16S, 18S, ITS).
2. Electroforesis en gel de agarosa:
   • Cargar el gel con el producto de PCR (fragmento de ADN amplificado).
   • Tinción del ADN (ej., bromuro de etidio) y visualización (ej., luz UV).
   • Electroforesis (aplicación de campo eléctrico).
3. Extracción del fragmento de ADN del gel:
   • Sistemas de protección: guantes y máscara facial de protección UV.
   • Escisión de la banda del tamaño correspondiente al fragmento amplificado.
4. Purificación:
   • Purificación del fragmento de ADN contenido en la banda de gel cortada con kits de extracción de ADN de gel.
   • Alternativamente, purificación del producto de PCR (sin electroforesis) con kits de purificación de PCR.
5. Secuenciación automática: Obtención de la secuencia de ADN (nucleótidos) del fragmento amplificado por PCR.
6. Análisis de la secuencia – Bases de datos de ADN:
   • Edición de la secuencia.
   • Formato FASTA.
   • Programas (ej., BLAST) que comparan nuestra secuencia con secuencias de bases de datos (ej., NCBI).

Reacción en Cadena de la Polimerasa Cuantitativa (qPCR)

• Amplificación de ADN/ADNc/ARN diana de la muestra (saliva/orina) con sondas fluorescentes o tintes de unión al ADN.
• Diana: Gen específico de un patógeno o gen de resistencia a antimicrobianos.
• Importante en el diagnóstico clínico.
• Técnicas: SYBR Green, TaqMan.

Métodos Proteómicos: MALDI-TOF

• Basado en el análisis del espectro proteico que genera un microorganismo y la comparación de su espectro con los perfiles proteicos de una base de datos.
• MALDI-TOF: MALDI (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization, desorción/ionización por láser asistida por matriz); TOF (Time-Of-Flight, tiempo de vuelo).
• El espectro de proteínas generado se compara con espectros de organismos de una base de datos (ej., MALDI Biotyper^®).
• Según la similitud con el perfil más próximo, se obtiene una valoración (fiabilidad de la identificación).
• MALDI Biotyper^®: Contiene 488 especies de bacterias y levaduras clínicamente relevantes (>98% de patógenos cultivables).
• Generalmente requiere cultivo previo del microorganismo en placa Petri.
• Frecuente en el diagnóstico clínico.

Secuenciación Masiva (Next-Generation Sequencing)

• Extraer todo el ADN de la muestra y, con equipos de secuenciación masiva, identificar los distintos organismos.
• Pasos: Kits de extracción de ADN; amplificación del fragmento de ADN deseado (PCR); secuenciación de los distintos fragmentos; procesamiento bioinformático de las secuencias; identificación de todas las especies en la muestra.

Ensayo por Inmunoabsorción Ligado a Enzimas (ELISA)

1. El anticuerpo de captura se une a los pocillos de la placa ELISA.
2. Se agrega la muestra, y el antígeno se une al anticuerpo.
3. Se lava la microplaca, eliminando el material no unido.
4. Se agrega el anticuerpo de detección, conjugado con enzimas de detección.
5. Se lava la microplaca, eliminando los anticuerpos no unidos.
6. Se agrega el sustrato, que es convertido por la enzima de detección, produciendo un cambio de color.
7. Se lee la placa, detectando el producto de la reacción.
8. Se calculan los resultados, determinando la cantidad de antígeno en cada muestra.

Microorganismos Contaminantes del Agua

• Microorganismos patógenos: Presentes en excretas de personas o animales enfermos.
• Microorganismos oportunistas: Producen enfermedades en determinadas circunstancias.
• Principales enfermedades microbianas transmitidas por el agua:
  • Bacterianas: Cólera (Vibrio cholerae); fiebre tifoidea (Salmonella typhi); fiebre paratifoidea (Salmonella paratyphi); disentería o shigelosis (Shigella), entre otras.
  • Víricas: Poliomielitis (poliovirus, enterovirus de Picornaviridae); hepatitis A (VHA); diarreas (virus, Rotavirus).
  • Protozoarias: Amebiasis (Entamoeba histolytica); giardiasis (Giardia lamblia); criptosporidiosis diarreica (Cryptosporidium sp.).

Clasificación y Usos de los Tipos de Agua

1. Aguas de consumo humano:
   • De cualquier origen y tipo de suministro (redes de distribución, cisternas, depósitos): para beber, cocinar, preparar alimentos, higiene personal y otros usos domésticos.
   • En la industria alimentaria: para la fabricación, tratamiento, conservación o comercialización de productos alimentarios y para la limpieza de superficies, objetos y materiales que puedan estar en contacto con alimentos.
2. Aguas de baño:
   • Aguas superficiales donde se bañan personas o existe actividad relacionada con el baño.
   • Zona de baño: al menos un punto de muestreo (PM) para la recogida periódica de muestras para control de calidad.
   • El control sanitario se realiza durante la temporada de baño (periodo de afluencia importante de bañistas).
3. Aguas residuales: Agua que ya ha sido usada y que contiene contaminantes físicos, químicos o biológicos.
   • Contaminantes dependiendo del origen (necesario tratarlas antes de que vuelvan al medio ambiente):
     • Materia orgánica: restos de comida, heces, orina.
     • Detergentes, aceites y productos químicos.
     • Microorganismos patógenos: E. coli, Salmonella, etc.
     • Metales pesados en el caso de algunas industrias.
     • Fármacos y hormonas.
4. Aguas regeneradas: Aguas residuales depuradas que han sido sometidas a un proceso de tratamiento adicional o complementario que permite adecuar su calidad al uso al que se destinan.
   • Uso para consumo humano e industria alimentaria: prohibido (RD 1620/2007), salvo situación de declaración de catástrofe.
5. Piscinas, parques acuáticos y centros de hidroterapia: Instalaciones formadas por vasos destinados al baño, al uso recreativo, entrenamiento deportivo o terapéutico, así como las construcciones complementarias y servicios necesarios para garantizar su funcionamiento.
6. Agua para la industria farmacéutica:
   • Agua purificada o altamente purificada: Empleada en la fabricación de productos farmacéuticos no inyectables o como excipiente en fórmulas farmacéuticas. También se usa como base para obtener otros tipos de agua de calidad superior.
   • Agua para inyectables: Empleada en preparados estériles destinados a la administración por vía parenteral.

Fundamentos de la Microbiología Alimentaria

• Microbiología alimentaria: Estudia los microorganismos que habitan, producen o contaminan los alimentos.
• Principal objetivo: Detectar y cuantificar el contenido de microorganismos en los alimentos, minimizando riesgos de contaminación y previniendo brotes de enfermedades de origen alimentario.
• Enfermedad de origen alimentario (microorganismos): Causada por la ingestión de alimentos o bebidas contaminadas con bacterias, virus, hongos, parásitos, toxinas o metabolitos (producidos por microorganismos).
• Infecciones alimentarias: Ocasionadas por ingerir microorganismos vivos que se han multiplicado hasta altas concentraciones antes de consumir el alimento. Una vez ingeridos, invaden el organismo.
• Intoxicaciones alimentarias: Provocadas por la ingesta de toxinas o metabolitos producidos por los microorganismos presentes en un alimento (también otros contaminantes de origen no microbiano).
• Criterio microbiológico de un alimento: Aceptabilidad de un producto o lote, en base a la ausencia/número de microorganismos o cantidad de toxinas/metabolitos por unidad de masa o volumen.
• Criterio de seguridad alimentaria: Aceptabilidad de un producto o lote comercializado.
• Criterio de higiene del proceso: Valor de contaminación. Un valor superior indica la necesidad de medidas correctoras de la higiene del proceso.
• Lote: Grupo de productos obtenidos de un proceso y en un tiempo determinados.
• Vida útil de alimento: Tiempo tras la producción antes de perder sus propiedades en condiciones adecuadas de almacenamiento.

Proceso de Diagnóstico Microbiológico de Enfermedades Infecciosas

1. Paciente con signos y síntomas de enfermedad infecciosa.
2. Examen médico y diagnóstico presuntivo.
3. Solicitud de recolección de muestra/s para diagnóstico microbiológico.
4. Orden de examen y muestra/s se trasladan al laboratorio. Datos al sistema informático.
5. Envío al laboratorio.
6. Diagnóstico microbiológico directo o indirecto.

Manual de Toma de Muestras

Actualizado en base a las últimas evidencias disponibles. Debe detallar:

1. Tipo de muestra apropiado.
2. Forma de recolección.
3. Número y cantidad de muestra/s.
4. Envase.
5. Condiciones de transporte al laboratorio (tiempo, temperatura).
6. Conservación (temperatura, condiciones, tiempo máximo).

Niveles de Bioseguridad en Laboratorios Microbiológicos

Áreas Básicas de un Laboratorio de Microbiología

• Sección de toma de muestras de pacientes ambulatorios.
• Sección de recepción y registro de muestras: primera evaluación.
• Sección de medios de cultivo: preparación de medios, lavado y esterilización de material.
• Área de almacén: con cámara fría o frigorífico.
• Áreas especializadas: Sección de Bacteriología (siembras, tinciones, antibiogramas); Sección de Micología; Sección de Virología; Sección de Serología o Inmunología; Sección de Biología Molecular.

Diagnóstico Microbiológico Directo e Indirecto

• Diagnóstico microbiológico directo: Evidencia directamente el microorganismo en la muestra.
  • Observación directa de la muestra: examinación microscópica (con o sin tinción).
  • Cultivo de la muestra, aislamiento y posterior identificación.
  • Selección del medio: Basada en el diagnóstico presuntivo del paciente, el sitio de recolección de la muestra y la fisiología de las bacterias u hongos que podrían estar causando la infección.
  • Identificación del microorganismo: Si es cultivado, identificación por métodos basados en aislamiento y cultivo. Si no es cultivado, identificación en base a la observación directa de la muestra o secuenciación de ácidos nucleicos.
• Diagnóstico microbiológico indirecto: Detección del patógeno a través de los anticuerpos específicos producidos por el hospedador: identificación inmunológica (kits de anticuerpos, aglutinación en látex, ELISA, etc.).

Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana (Antibiograma)

• Determina la susceptibilidad de bacterias y hongos a los antimicrobianos in vitro, bajo condiciones específicas y estandarizadas de laboratorio (antibiograma).
• Objetivo: Guiar en la elección de una terapia antimicrobiana adecuada.
• Puede ser realizado a través de tres técnicas:
  1. Difusión con disco.
  2. Epsilometría o E-test.
  3. Prueba de susceptibilidad antimicrobiana por dilución.

Método de Difusión con Disco (Kirby-Bauer)

• Reporta información cualitativa de la sensibilidad de un microorganismo a un antimicrobiano (sensible, intermedio o resistente).
• Consiste en la difusión de un antimicrobiano impregnado en un disco de papel, sobre la superficie de una placa de agar sembrada previamente con el microorganismo. Si el microorganismo es sensible, se observa un halo de inhibición.

Coprocultivo: Recolección y Procesamiento de Muestras Fecales

• Medio Cary-Blair: Medio líquido utilizado para la recolección, transporte y conservación de muestras fecales y rectales para análisis bacteriológicos, especialmente para patógenos entéricos. Permite la viabilidad de microorganismos como Campylobacter y Vibrio durante 24-48 horas.

Recogida de Heces para Coprocultivo

1. Breve información: Consiste en la recogida de una muestra de heces para su posterior análisis en el laboratorio. El objetivo es la detección de la causa de gastroenteritis infecciosas agudas; solo son útiles las muestras recogidas en la fase aguda de la enfermedad. Las muestras deben entregarse en un plazo máximo de 24 horas tras su recogida y ser conservadas en nevera (2-8ºC).
2. Material necesario que le entregarán en el Centro: Un frasco estéril de 100 mL de boca ancha y tapón de rosca.
3. Preparación previa del paciente: No requiere.
4. Procedimiento de recogida:
   • Recoger las heces sobre un recipiente limpio y seco (orinal/cuña) que no contenga restos de jabón, detergente o desinfectante.
   • Introducir las heces (muestras formadas/pastosas: 2-3g; acuosas: 5-10 mL) en el frasco con la cucharilla del envase o un depresor de madera. Si hay sangre, moco o pus, seleccionar esa porción. Evitar la contaminación con orina.
   • Cerrar el frasco enroscando bien el tapón.
   • Identificar el frasco con su nombre y apellidos.
   • Conservar en un sitio fresco hasta su entrega en el laboratorio.
   • Ese día, acudir por la mañana a la sala de extracciones del hospital y entregar el frasco cerrado e identificado.

Principios de la Serología en Diagnóstico Microbiológico

Directa

1. La muestra se agrega a los pocillos.
2. Unión de las proteínas al plástico.
3. El anticuerpo de detección conjugado se une al analito inmovilizado.
4. La reacción de color enzimática es proporcional a los anticuerpos unidos.

Sandwich

1. Los pocillos son recubiertos previamente con el anticuerpo de captura.
2. Se agrega la muestra y el analito se une al anticuerpo de captura.
3. El anticuerpo de detección conjugado se une al analito inmovilizado.
4. La detección indirecta y la reacción enzimática son proporcionales al analito.

Competitivo

1. Los pocillos son recubiertos previamente con anticuerpo de captura secundario.
2. El anticuerpo de captura, el conjugado y la muestra se agregan simultáneamente.
3. El analito y el conjugado compiten por la unión.
4. La reacción de color enzimática es inversamente proporcional al conjugado unido.

Medios de Cultivo para Exudado Faríngeo

• Agar Sangre: Combinación de agar base (agar nutritivo) con un 5% de sangre ovina. Es un medio rico donde crecen muchos microorganismos. Se usa para observar la capacidad hemolítica (factor de virulencia) de microorganismos patógenos. Observando los halos hemolíticos alrededor de las colonias se determina el tipo de hemólisis:
  • Alfa (α): Halos verdosos (oxidación de la hemoglobina de los glóbulos rojos a metahemoglobina en el medio).
  • Beta (β): Halos incoloros (hemólisis total).
  • Gamma (γ): Inexistencia de halos (sin hemólisis).
• Agar Chocolate (CHOC): Medio de cultivo enriquecido y no selectivo. Es una variante del agar sangre que contiene glóbulos rojos lisados por calentamiento a 56 °C. Se usa para el crecimiento de bacterias respiratorias que necesitan factores de crecimiento (ej., Haemophilus influenzae). Ejemplos de factores de crecimiento: NAD (V), hemina (X), componentes que se encuentran dentro de los glóbulos rojos; prerrequisito para el crecimiento: lisis de glóbulos rojos.

Toma y Procesamiento de Muestras de Esputo

Tipos de Esputo (según recogida):

• Espontáneo.
• Inducido por aerosoles: (15% NaCl, 10% Glicerina) para la detección de Pneumocystis jirovecii (anteriormente Pneumocystis carinii).
• Cepillado bronquial mediante broncoscopia.
• Aspirado gástrico.

Observación Directa del Esputo al Microscopio:

Por campo deben observarse más de 25 leucocitos y menos de 10 células epiteliales, lo que indica que la muestra es válida y tiene poca saliva.

• Muestra válida: Se observan leucocitos.
• Muestra NO válida: No hay leucocitos y hay células epiteliales.

Siguientes Pruebas:

• Tinciones.
• Cultivo y aislamiento del patógeno.
• Serología (sobre todo para neumonías atípicas).
• Detección de antígenos en orina (legionelosis, neumonía por neumococo).

Protocolos para investigar bacterias patógenas en esputos: Cultivo en agar sangre, agar chocolate, medio Bycey y Löwenstein-Jensen.

Prueba de la Tuberculina (Test de Mantoux)

• Test de Mantoux (prueba TB).
• Se inyecta derivado proteico purificado (PPD) de una parte del bacilo tuberculoso (antígeno) y se lee la reacción a las 48-72 horas.

Resultados Posibles:

• ≥ 5 mm: Positivo en pacientes con alto riesgo de desarrollar la enfermedad activa (ej., personas infectadas por VIH o que han estado expuestas a pacientes con tuberculosis activa).
• > 10 mm: Positivo en personas con mayor probabilidad de infección reciente, como inmigrantes recientes de países con alta prevalencia, usuarios de drogas inyectables y trabajadores de la salud expuestos.
• ≥ 15 mm: Positivo en personas con bajo riesgo de tuberculosis.

Tosferina (Bordetella pertussis)

1. Fase catarral: Puede durar de 1 a 2 semanas.
   • Síntomas: Secreción nasal o moqueo, fiebre baja, tos leve ocasional (muy contagiosa).
2. Fase paroxística: Dura de 1 a 6 semanas, hasta 10 semanas.
   • Síntomas: Accesos de tos rápida seguidos de un silbido al respirar; vómito y agotamiento (paroxismos).
3. Fase de convalecencia: Dura de 2 a 3 semanas; muchas personas son susceptibles a otras infecciones respiratorias.
   • La recuperación es gradual. Se alivia la tos, pero pueden regresar los accesos de tos.

Septicemia y Fungicemia: Infecciones del Torrente Sanguíneo

• Invasión persistente del torrente circulatorio por bacterias u hongos que da lugar a manifestaciones clínicas de infección sistémica (fiebre, taquicardia, leucocitosis).
• Cualquier infección con evidencia de respuesta clínica sistémica.
• Vías de entrada de microorganismos a la sangre: Tracto urogenital, tracto respiratorio, abscesos, heridas quirúrgicas infectadas, tracto biliar, varias (tracto gastrointestinal), indeterminada, picaduras (zoonosis).
• Microorganismos más frecuentes: Los más frecuentes en septicemias son los Streptococcus coagulasa-negativos.
• Factores que contribuyen al desarrollo de una septicemia:
  • Uso de agentes inmunosupresores.
  • Uso generalizado de antibióticos de amplio espectro.
  • Supervivencia prolongada de pacientes debilitados.
  • Pacientes gravemente enfermos.
• Procedimientos quirúrgicos: Catéteres intravenosos y prótesis vasculares pueden ser colonizados por Staphylococcus epidermidis.
• Falsos positivos por contaminación con microorganismos de la piel al hacer la extracción de sangre: Staphylococcus epidermidis, Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus, Corynebacterium sp., Staphylococcus epidermidis.

Sepsis: Origen Comunitario e Intrahospitalario

• Sepsis adquirida en la comunidad: Entorno rural o urbano, zoonosis, entre otros factores.
  • Frecuentes: E. coli y otras Enterobacterias; Streptococcus pneumoniae (neumococo); Staphylococcus aureus.
  • Poco frecuentes: Neisseria meningitidis (meningococo); Salmonella (tracto digestivo); Anaerobios; Pseudomonas aeruginosa; Salmonella enterica; Brucella.
• Sepsis de origen intrahospitalario: Varían en función de la puerta de entrada (catéteres, etc.), del estado del paciente, existencia de otras infecciones; pueden iniciarse en el medio ambulatorio.
  • Frecuentes: E. coli y otras Enterobacterias; Staphylococcus aureus; Staphylococcus epidermidis y otros estafilococos coagulasa-negativos; Pseudomonas aeruginosa; Acinetobacter baumanii y otros BGN-NF; Streptococcus viridans; Enterococcus sp.
  • Poco frecuentes: Candida; Bacteroides fragilis y otros; Clostridium perfringens y otros; Corinebacterias.
• Un catéter central de plástico colocado a largo plazo puede presentar colonización por estafilococos coagulasa-negativos, con aparición de bacteriemia continua.
• Escherichia coli puede causar pielonefritis. Posteriormente, las bacterias pueden introducirse en el torrente sanguíneo causando una bacteriemia transitoria, y a continuación puede iniciarse un shock séptico.

Infecciones Asociadas a Catéteres

• Infección local: En el extremo de salida del catéter o como infección del túnel que se extiende entre la piel y el tejido subcutáneo a lo largo del catéter insertado en las venas centrales (la denominada línea central).
• Infección del torrente sanguíneo.
• Agente etiológico: Microbiota bacteriana cutánea que migra a lo largo del catéter o penetra en la sangre a través del acceso vascular durante la infusión o inyección de medicamentos.
• Agentes etiológicos más frecuentes: Estafilococos coagulasa-negativos (Staphylococcus epidermidis), S. aureus, Enterococcus spp., Candida spp., bacilos Gram-negativos.

Punción Lumbar: Procedimiento y Muestreo de LCR

• Desinfección intensa con povidona yodada.
• Inserción aséptica de la aguja en el espacio subaracnoideo a nivel de las vértebras lumbares.
• Presión de apertura (80-180 mm H₂O).
• Retirar 2-4 tubos estériles para: Microbiología, Hematología y Bioquímica.
• Volumen >10 mL (especialmente para M. tuberculosis).
• Transporte inmediato, no refrigerar, excepto para analizar virus.
• Examen macroscópico: Transparente, turbio (purulento), hemático. Centrifugación 15 minutos a 2.500 r.p.m., decantar el sobrenadante, dejar 0.5 mL y resuspender.
• Examen microscópico: Cultivo e identificación, detección de antígenos y otras técnicas en líquido cefalorraquídeo (LCR), en suero (serología) o en biopsia.

Clasificación de las Infecciones Cutáneas

• Tipo de infecciones que afectan a la piel y tejidos adyacentes: Infecciones cutáneas primarias; infecciones cutáneas superficiales; infecciones y abscesos del tejido subcutáneo.
• Tipo de infecciones según el agente etiológico:
  • Infecciones bacterianas.
  • Infecciones por hongos.
  • Infecciones víricas.
• Infecciones sistémicas dermatológicas: Tuberculosis, lepra, sífilis.
• Infecciones sistémicas no dermatológicas: Exantemas, eritemas, púrpuras.
• Infecciones cutáneas secundarias: Quemaduras, lesiones traumáticas, úlceras crónicas.
• Infecciones quirúrgicas.

Toma de Muestras: Biopsia de Piel y Muestras para Hongos

• Biopsia por rasurado: Muestra de las capas superiores de la piel con una hoja de afeitar o un bisturí (capas superficiales).
• Biopsia con sacabocados: Utiliza una herramienta especial (sacabocados) para obtener muestras de capas profundas de la piel.
• Biopsia por escisión: Utiliza un bisturí para extirpar toda la lesión. Incluye el grosor completo de la piel y la grasa subyacente (ej., verrugas).
• Abscesos cerrados: Muestra obtenida con jeringa o mediante apertura y torunda.
• Heridas abiertas: Muestra obtenida con torunda (húmeda o con alginato si la herida está seca).
• Toma de muestra para hongos:
  • Escamas: Raspado de la lesión con lanceta o bisturí sobre placa.
  • Cabellos y pelos: Seleccionar cabellos enfermos (identificados con luz de Wood), arrancados y depositados en placa estéril.
  • Fragmentos de uña: Cortarlas con tijeras; tejido periungueal; tomar escamas del lecho subungueal anterior.
  • Exudados de las mucosas: Raspado.
• Líquido de transporte: Suero fisiológico + penicilina + estreptomicina + cloranfenicol.

Diagnóstico Microbiológico de Infecciones Congénitas

• Reacción en cadena de la polimerasa (PCR): Es el método más sensible y específico, por lo que representa el método de elección.
• Serología: Útil en el estudio de la sífilis (serología no treponémica y treponémica) y en el control de la gestante (IgG, IgM, IgA iniciales y seriadas). Cada vez menos utilizada en el periodo neonatal.
• Estudio de lesiones cutáneas: Útil en el estudio de varicela-zóster y herpes simple.
• Cultivo celular: En el neonato son útiles los cultivos de orina para citomegalovirus y rubéola, y el de heces para enterovirus.

Infecciones del Tracto Urinario (ITU)

• ITU baja:
  • Disuria, polaquiuria, urgencia miccional.
  • Dolor suprapúbico.
  • Hematuria (inconstante).
• ITU alta:
  • Fiebre > 37,7ºC y escalofríos.
  • Dolor en el flanco.
  • Sensibilidad en el ángulo costovertebral.
• La vía ascendente es la más frecuente → colonización del introito vaginal por flora uropatógena fecal.
• Ascensión vía uretral (escasa longitud en la mujer) a la vejiga → ITU baja.
• Ascensión por uréteres a los riñones → ITU alta (probable ITU baja no tratada).
• Poco frecuente la ITU alta vía hematógena (salvo tuberculosis y abscesos).

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