Conceptos Fundamentales de la Señalización Inmunológica

• La vía de señalización de IL-1: la proteína adaptadora inicial es MYD88.
• Si la célula puede activar la vía NF-κB (Supervivencia) a tiempo y producir suficiente cFLIP, se salva.
• La unión del IFN-γ obliga a las entidades del receptor a acercarse físicamente; estos procesos se conocen como dimerización.
• La inflamación aguda se caracteriza principalmente por la alta cantidad de neutrófilos y linfocitos Th17.
• Las JAKs son las enzimas de guardia que se activan primero y comienzan a fosforilar todo.
• El metotrexato ejerce su efecto principal inhibiendo la hidrofolato reductasa (✓ Verdadero).
• Las citocinas se definen como glicoproteínas de bajo peso molecular que actúan como mensajeros químicos.
• Antes de la aparición de los linfocitos, los organismos ya utilizaban péptidos antimicrobianos como defensinas.
• El receptor de IL-2 requiere de una subunidad Alfa solo para una mayor afinidad (✗ Falso).
• La artritis reumatoide afecta principalmente articulaciones sinoviales.
• Los receptores clase 1 poseen un motivo WSXWS.
• La familia de la IL-1 activa la vía de las MAP lipasas.
• Los receptores de clase 1 regulan la hematopoyesis.
• TRAF6 participa en la activación de TAK1.
• Una citocina que actúa sobre la misma célula que la produjo se denomina autocrina.

Vía de Señalización de los Receptores de IL-1

1. Activación del Receptor

• IL-1 (α o β) se une a su receptor IL-1R tipo 1 en la membrana.
• Se recluta una proteína accesoria: IL-1RACP.
• Se forma un complejo que activa los dominios TIR.
• Esto inicia la señal inmunitaria innata.

2. Cascada Intracelular: Adaptadores y Quinasas

• El dominio TIR recluta MYD88.
• MYD88 atrae a IRAK (una quinasa).
• Se une TRAF6, que activa TAK1.
• TAK1 se estabiliza con TAB1 y TAB2.
• Desde TAK1, la señal se bifurca:
  • Ruta NF-κB → inflamación.
  • Ruta MAPK → respuesta al estrés.

Receptores de Citocinas Clase I y II

Clasificación y Estructura

• Clase I (hematopoyetina): IL-2, IL-6, GM-CSF, hormona del crecimiento.
• Clase II (interferones): IFN-α/β/γ, IL-10.

🔹 Motivos estructurales:

• Clase I: CCCC + WSXWS.
• Clase II: CCCC, sin WSXWS.

Vía JAK/STAT: Transducción de Señal

Proceso de Activación

• Los receptores no tienen actividad quinasa propia.
• Reclutan JAKs (Janus Kinases) como enzimas asociadas.
• Al unirse la citocina, las subunidades del receptor se acercan (dimerización).
• Las JAKs se auto-fosforilan y fosforilan residuos de tirosina en el receptor.
• Se crean sitios de anclaje para STATs.

Activación de STATs

• STAT se une al receptor usando su dominio SH2.
• JAK fosforila a STAT → STAT se libera.
• Dos STATs fosforilados se dimerizan.
• El dímero entra al núcleo → activa genes específicos.

Ejemplo Funcional

• IL-2 se une a su receptor (α, β, γ) → activa JAK1 y JAK3 → activa STATs → proliferación de linfocitos T.
• IFN-γ activa macrófagos → señal de alerta antiviral máxima.

Receptores de TNF y Apoptosis

Esta sección trata sobre cómo ciertas proteínas (los receptores de TNF) participan en la muerte celular programada (apoptosis) y en la activación de señales dentro de la célula.

🔹 Receptores TNF

• Son proteínas en la membrana de las células que reciben señales externas.
• Ejemplos: TNF R1, R2, R3, FAS, CD40L, etc.
• Tienen dominios extracelulares ricos en cisteína y dominios intracelulares que activan procesos internos.

🔹 Funciones principales

• Activan la vía clásica de NFkB (una señal que regula inflamación y supervivencia celular).
• Participan en la cooperación entre células T (clave en el sistema inmunológico).
• Inician mecanismos de muerte celular cuando es necesario.

Ruta Canónica (Pasos de Activación)

1. Paso A.1: El ligando (señal) se une al receptor → se forma el complejo de muerte con proteínas como TRADD, RIP1, TRAF2.

• Paso A.2: El complejo se separa:
  • TRADD va a la membrana.
  • RIP1 y TRAF2 al citoplasma.
  • TRADD queda inactiva.
• Paso A.3: Se activa el complejo U (con caspasas) → destruyen proteínas clave → se genera la señal de muerte celular.

Reproducción Asexual

• Ocurre en organismos unicelulares como bacterias.
• Se dividen por el contenido celular, es decir, copian su material y se separan.
• No necesitan otra célula para reproducirse.

🔹 Factores que influyen

• Puede ocurrir por causas ambientales (como temperatura, nutrientes).
• Es un proceso ordenado y natural que permite que se multipliquen rápidamente.

Vía de Señalización de TLR4 (LPS)

Paso B1: Inicio de la Señal

• El LPS se une al receptor TLR4 en la membrana celular.
• Se activan proteínas adaptadoras: MyD88, TRIF, TRAM, TIRAP.
• Se activan quinasas: IRAK1, IRAK4.
• Se activa TRAF6, que participa en la ubiquitinación.
• Se activan MAP cinasas: Akt, ERK, JNK, p38.
• Se activan factores de transcripción: AP-1 y NF-κB.

Paso B2: Liberación de NF-κB

• TRAF6 se une al complejo TAB1, TAB2, TAK1.
• Esto separa IκB, el inhibidor de NF-κB.
• NF-κB queda libre para entrar al núcleo.

Paso B3: Respuesta Celular

1. NF-κB entra al núcleo y activa genes de supervivencia (antiapoptóticos).
2. Se activa nuevamente Akt.
3. Se refuerza la activación de AP-1.

• La célula sobrevive, se protege de la apoptosis y produce inflamación.
• Se prepara para combatir la amenaza bacteriana.

Características de los Receptores IL-17

• Están presentes en neutrófilos, células T, NK y otras.
• No tienen secuencias típicas en sus dominios extracelulares.
• En su parte interna tienen un dominio llamado SEFIR, que permite la señalización.

🔹 Mecanismo de Acción

• La proteína IL-17 se une al receptor.
• Si se acopla correctamente la proteína adaptadora SEFIR, se activa la señal.
• Esto puede llevar a apoptosis (como en el receptor FAS) si el proceso es exitoso.
• Se activa una cascada de señalización que termina en inflamación.
• También se involucran interferones, que ayudan a combatir virus.

Citometría de Flujo: Principios y Aplicaciones

La citometría de flujo es una tecnología que permite la medición simultánea de múltiples características físicas de las células individuales a alta velocidad.

Medición de Propiedades Celulares

• Tamaño y granularidad:
  • La luz dispersada en la dirección frontal perpendicular al láser se llama forward scattered light (FSC) y es proporcional al tamaño de la célula.
  • La luz reflejada y dispersada en un ángulo de 90° se llama side scattered light (SSC) y es proporcional a la complejidad interna de la célula.

Sistema de flujo: Fórmula de Reynolds $R_v = \frac{\rho v D}{\mu}$

Componentes del Citómetro de Flujo

• Sistema óptico: Genera y recolecta las señales luminosas generadas en el punto de interrogación (excitación y recolección).
• Óptico de recolección: Los filtros ópticos están construidos con materiales que absorben ciertas longitudes de onda y transmiten otras, como: tipos de filtros long pass, short pass, band pass.
• Sistema electrónico: Convierte las señales luminosas en señales eléctricas y digitalizadas para poder analizarlas en una computadora, midiendo pasos de voltaje que pueden incluir altura, amplitud y área.

Aplicaciones Clave

• Fluorescencia: Es la luz emitida por fluoróforos al hacer incidir luz determinada en una longitud de onda específica.
• Identificación de marcadores celulares: La fluorescencia de células se utiliza para la identificación de marcadores celulares con anticuerpos.
• Inmunofenotipificación: Es la identificación y comunicación de poblaciones celulares mediante anticuerpos marcados con fluoróforos.
• Análisis del ciclo celular: Determinación de fases del ciclo celular (G0/G1, S, G2/M).
• Detección de apoptosis: Evaluación de células apoptóticas usando marcadores que adhieren el yoduro propidio.
• Cuantificación de proteínas intracelulares: Medición de citocinas, factores de transcripción o señales intercelulares después de la permeabilización de la célula.

Etiquetas: JAK/STAT, Receptores inmunes, señalización celular, Vía NF-kB