Producción de la Vacuna contra la Influenza Estacional en Huevo Fértil de Ave

Los virus de la influenza humana poseen un genoma de ARN fraccionado. Cuando dos tipos virales, como el AH2N2 y el AH1N1, infectan simultáneamente a una misma célula, puede ocurrir un intercambio de material genético. Como consecuencia, se forma una nueva cepa viral, lo que conlleva implicaciones epidemiológicas significativas.

Aún no se conoce con exactitud el mecanismo mediante el cual los virus realizan este intercambio y modifican su virulencia. Este es un riesgo latente cuando se preparan vacunas: al inocular huevos con diferentes cepas, puede producirse un intercambio genético que resulte en la aparición inesperada de una nueva variante viral.

La dosis estándar de 0.5 ml contiene 45 mg de hemaglutinina purificada de cada uno de los tres viriones vacunales incluidos en la formulación.

Control de Microorganismos (Parte 2)

Existen dos tipos principales de agentes para el control microbiano: agentes físicos y agentes químicos.

1) Agentes Físicos

A) Temperatura

a.1. Altas Temperaturas

• Calor seco
• Calor húmedo

a.2. Bajas Temperaturas

• Refrigeración
• Congelación

B) Desecación

Consiste en deshidratar o eliminar el agua del medio. El agua que requieren los microorganismos se conoce como actividad del agua y se simboliza como (aw).

• El punto óptimo de la actividad del agua (aw) es 1.
• La mayoría de los patógenos requieren una aw de 0.9.
• Si se reduce la actividad del agua a una condición de 0.8, el microorganismo ya no puede cumplir sus funciones vitales.
• Los microorganismos xerofíticos (que viven en condiciones de baja humedad) tienen una actividad de agua de 0.75.
• Ejemplo: Las arqueobacterias y ciertos grupos conocidos como sacarófilos (donde se incluyen las levaduras).

La eliminación del agua afecta significativamente a los microorganismos, frenando drásticamente su multiplicación. Asimismo, una alta concentración de sal crea un medio hipertónico donde las bacterias no pueden sobrevivir.

C) Radiación

Consiste en la emisión de ondas electromagnéticas de diferente longitud. Se consideran dos tipos:

• Radiación Ionizante: Incluye los rayos X, rayos gamma y rayos infrarrojos. Tienen la capacidad de atravesar casi cualquier material, excepto el plomo, que actúa como bloqueador. Se utiliza para esterilizar productos que se alterarían con el calor. Actúa desnaturalizando el ADN (cromosoma), haciendo que el microorganismo deje de ser viable.
• Radiación No Ionizante: Destacan los rayos ultravioleta (UV). Tienen limitaciones de penetración y se utilizan principalmente en trabajos de investigación. Actúan como mutágenos, provocando una mutación inducida que modifica el cromosoma bacteriano.

D) Filtración

Este método es conocido como «esterilización en frío». La filtración consiste en hacer pasar un líquido a través de un filtro bacteriológico cuyos poros son capaces de retener bacterias. Sin embargo, cuando se trata de virus, estos logran atravesar los poros, por lo que el líquido filtrado no queda completamente estéril.

Históricamente, Ivanovsky demostró la existencia de los virus al estudiar el mosaico del tabaco utilizando filtros de Chamberland; el filtrado resultante seguía siendo infeccioso. En investigación, se utiliza el filtro de membrana (delgado y cuadriculado). Por ejemplo, para detectar enterobacterias gastrointestinales, se usan filtros en medios como MacConkey, donde las colonias que utilizan lactosa se tornan de color rojo o blanquecino.

E) Calor Discontinuo y la Teoría de la Biogénesis

Este método se atribuye a John Tyndall. Históricamente, la idea de la generación espontánea (la vida se origina de materia orgánica muerta) fue defendida por Aristóteles. No obstante, científicos como Francesco Redi se opusieron, planteando la hipótesis «Omne vivum ex ovo» (toda vida se origina de un huevo).

Experimentos Clave:

• Needham: Hirvió carne en un balón y lo tapó con un corcho; al observar microorganismos, creyó confirmar la generación espontánea.
• Lazzaro Spallanzani: Refutó a Needham sellando herméticamente los frascos, lo que impidió el crecimiento microbiano. Los defensores de la generación espontánea argumentaron que se bloqueaba la «fuerza vital».
• Louis Pasteur: Utilizó matraces con cuello de cisne para permitir la entrada de aire pero atrapar los microorganismos por gravedad, demostrando que no hay contaminación si no hay contacto directo. Así nació la teoría «Omne vivum ex vivum» (la vida se origina de la vida).
• Tyndall y la Tyndalización: Al trabajar con heno, Tyndall descubrió las bacterias esporuladas. Notó que el hervor eliminaba la forma vegetativa (sensible al calor), pero la espora (rica en ácido dipicolínico y calcio) resistía. La espora es una forma de sobrevivencia ante condiciones hostiles. Al hervir repetidamente con intervalos de 24 horas, logró eliminar las esporas al permitir que germinaran a formas vegetativas sensibles. Este proceso se denominó tindalización, refutando definitivamente la abiogénesis.

2) Agentes Químicos

Es fundamental distinguir dos conceptos:

• Desinfectante: Se aplica sobre materia inerte.
• Antiséptico: Se aplica sobre tejido vivo.

Principales Agentes Químicos:

• Alcoholes: Actúan deshidratando al microorganismo y desnaturalizando proteínas. Los más comunes son el etílico y el isopropílico. El alcohol al 70% (alcohol medicinal) es más efectivo que el de 98% porque tarda más en volatilizarse, permitiendo una mejor acción.
• Fenoles: Utilizados originalmente por Joseph Lister, precursor de la asepsia. En solución acuosa al 5%, desorganiza la membrana lipídica, provocando la pérdida de la semipermeabilidad celular.
• Metales Pesados: Mercurio (Hg), Plata (Ag) y Plomo (Pb). Son tóxicos que forman mercaptanos, inactivando a la bacteria. Se usan en concentraciones muy diluidas. Ejemplo: Nitrato de plata al 1% para prevenir infecciones por Neisseria gonorrhoeae; el mercurocromo o merthiolate como antiséptico; y el plomo como larvicida en partes por millón.
• Oxidantes y Halógenos: El yodo (antiséptico) y el hipoclorito de sodio (lejía/desinfectante). El cloro actúa oxidando las proteínas bacterianas.
• Detergentes: Alteran la tensión superficial de la membrana citoplasmática, actuando sobre los ácidos grasos.
• Alquilantes: Compiten con radicales alquilo. El formaldehído (formol) es un desinfectante potente; comercialmente al 40%, pero se utiliza habitualmente al 10%. Las sulfas actúan compitiendo con el PABA (ácido para-aminobenzoico).

Clasificación por Origen:

• Antibiótico: Sustancia producida naturalmente por microorganismos (hongos y bacterias).
• Quimioterápico: Sustancia producida artificialmente (drogas sintéticas).

Nota: El alcohol yodado es un excelente antiséptico que combina las propiedades de ambos agentes.

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